고무적인 점

고무적인 점은 TBK1이 가장 유의하게 감소한 단백질 중 하나였다는 것입니다(log 2 fold change = -0.6). 그 외 주목할 만한 발현량 감소 단백질에는 AAK1, GAK, AURKA 및 FLJ45252가 포함되었습니다. FLJ45252는 UniProt 데이터베이스 22 에 따르면 AAK1의 3' 비번역 영역(UTR)에 위치한 특성이 규명되지 않은 단백질입니다 . 중요하게도, PDK1 및 JAK1과 같은 기존 TBK1 억제제의 일반적인 오프타겟으로 알려진 여러 키나아제는 UNC8209 처리로 인해 유의미하게 변화하지 않았습니다( 그림 S1 A). 특히, IKKε 는 단백질체 분석에서 검출되지 않아 UNC8209에 의한 조절 여부를 평가할 수 없었습니다( 그림 S1 A).

단백질체 분석 결과를 검증하기 위해 면역블롯팅을 이용하여 AAK1, GAK, AURKA 단백질 수준을 측정하였다(현재 FLJ45252에 대한 항체는 존재하지 않음). UNC8209와 그 전신 화합물인 UNC6587은 모두 이들 단백질의 발현량을 감소시켰지만, 음성 대조 화합물(NEG)은 이러한 효과를 나타내지 않았다( 그림 2D ). TBK1 분해 활성이 향상된 UNC8209는 UNC6587보다 AAK1, GAK, AURKA 수준을 더욱 뚜렷하게 감소시켰다. 이러한 결과들은 전반적인 단백질체 데이터를 뒷받침하며, 단백질체 분석의 타당성을 입증한다.

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