행렬 최적화

결과

행렬 최적화

우리는 처음에 (1) 기질로 둘러싸인 채널에서 요관상피세포(UB 세포)의 단층 형성을 지원하고, (2) 기질 내에서 UB 분지 형태 발생을 허용하여 상호 연결된 네트워크를 형성하는 ECM 개발에 집중했습니다( 그림 1A ). UB 오가노이드는 Zeng 등 9 이 보고한 프로토콜을 적용하여 hiPSC로부터 생성했습니다. 다른 방법과 달리, 이 프로토콜은 UB 끝부분과 유사한 세포가 풍부한 고도로 증식 가능한 UB 오가노이드를 생성합니다.10 , 11 우리 는 UB 오가노이드를 해리하여 oUB를 얻었고, 이를 네 가지 후보 기질에서 2일 동안 2D 배양했습니다( 그림 1A ). 젤라틴-피브린(겔브린) 기질은 불멸화된 세포와 오가노이드 유래 근위세관 세포로 구성된 밀집 단층을 지지했지만, 27 , 28 우리는 이 기질에 부착되는 oUB가 거의 없으며, 부착된 세포들은 중간엽 유사 형태를 나타낸다는 것을 발견했습니다( 그림 1B 및 1C). 반면, BsM은 요관상피세포(UB) 오가노이드 분화에 널리 사용됩니다. 9 , 10 Matrigel과 Geltrex는 모두 신장 상피세포 접착을 촉진하는 것으로 알려져 있고 신장 세뇨관 기저막에 발현되는 라미닌과 콜라겐 IV를 함유하고 있습니다. 29 , 30 , 31 흥미롭게도, 50%(부피/부피) BsM에 파종한 oUB는 밀집된 단층을 형성하지 못했고, 1mg/mL 콜라겐 I 기질에 파종한 oUB는 상피세포와 유사한 조약돌 모양이 뚜렷하지 않은 단층을 형성했습니다( 그림 1B ). 그러나 이들 세포를 50%(부피/부피) BsM과 1mg/mL 콜라겐 I로 구성된 혼합 기질에 파종했을 때, 2일 후 거의 100%의 밀집도를 달성했습니다( 그림 1C ). 이러한 단층은 상피세포에서 흔히 볼 수 있는 특징적인 조약돌 모양을 나타냈습니다.

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